杜氏肌营养不良是最常见的一种肌营养不良，是主要影响男孩的严重疾病。据统计，全球大约每3,600个男孩中就有一人患有这种疾病。DMD基因突变会导致dystrophin蛋白损失，使患者出现进行性的肌无力，通常在二十多岁就会死亡。因此，DMD疾病的治疗一直是研究热点。
一、处于临床试验的药物
1. PTC公司公布Translarna的III期临床试验结果
2014年8月，PTC Therapeutics公司开发的Translarna（Ataluren / PTC124）获得欧盟药监当局的有条件上市批准，用于5岁及以上无义突变型杜氏肌营养不良（nmDMD）非卧床患者的治疗。此前，FDA已授予Translarna孤儿药地位。作为有条件上市的一部分，PTC公司需要在nmDMD中开展Translarna的验证性III期研究，并提交来自该研究的额外疗效和安全性数据。
在2015年底，PTC Therapeutics公司宣布了治疗DMD的药物Translarna 3期临床试验的结果。这次3期临床试验采取的方法是双盲、安慰剂对照，为期48周，共招募了228名患者。患者每公斤体重每天服用40毫克Translarna。
114名服用Translarna的患者， 6分钟行走距离平均提高15米。而三次临床试验都参加了的患者6分钟行走距离平均提高了47米，这是很明显的进步。最重要的是在临床试验期间，使用药物的患者没有一个失去行走能力，而使用安慰剂的患者，有4个失去了行动能力。服用药物的患者其他功能测试结果也好于使用安慰剂的患者。如10米走路测试，上下四级楼梯，北星肌肉运动评估测试等等。药物的安全性也良好。
PTC公司准备根据这次3期临床的结果向欧盟药监当局申请正式上市，并以滚动提交的方式向美国食品与药品管理局提交新药申请[1,2]。
Translarna药物机制：Translarna是一种蛋白质修复药物，开发用于由无义突变所致遗传性疾病的患者群体，选择性促进核糖体提前终止密码子而不是正常终止密码子的通读，旨在使含有无义突变的基因，产生功能性蛋白。若基因中存在无义突变，会导致蛋白质合成提前终止，产生无功能的蛋白。目前，Translarna正开发用于囊性纤维化（CF）和杜氏肌营养不良（DMD）的治疗。
2. ARM210获FDA授予孤儿药资格和罕见儿科疾病资格认定
2015年12月，RMGO Pharma公司开发的治疗杜氏肌营养不良的药ARM210/S48168获得美国食品与药品管理局孤儿药地位和罕见儿童疾病资格认定。目前ARM210的Ⅰ期临床试验正在欧洲进行，一期临床的目的是评估药物的安全性和药代动力学，接受试验的对象是健康的男性药物实验志愿者。Ⅰ期临床试验获得成功后，公司将与欧洲药监当局，进行探讨，开展针对杜氏肌营养不良患者的Ⅱ期临床试验[3]。
ARM210药物机制：杜氏肌营养不良患者由于细胞内的钙渗漏，造成的肌肉的损害和丧失功能。ARM210靶向兰尼碱受体Ryanodine Receptor (RyR)，这是一个细胞内部钙释放的通道。这是一种口服药，可以靶向骨骼肌，心肌和横膈膜，可以针对任何类型的抗肌萎缩蛋白的基因突变，可以进行单独药物的治疗，也可以结合其他的治疗方法进行治疗。动物实验显示ARM210改善了实验鼠的运动能力，抓地的力量和肌肉组织的形态。
二、基因治疗
1. 病毒导入
就是利用不直接引起人类疾病，免疫原性较小的腺相关病毒（AAV）为载体，导入人工剪裁的，去除大部分杆状区序列和羧基端序列的minidystrophin基因。AAV具有多达上百种血清型，广泛用于多种疾病的基因治疗，针对肌营养不良，选用对肌肉细胞有亲和性的血清型（AAV-1，AAV-2等）经过基因工程重组后作为载体，转载入约4Kb minidystrophin序列。在mdx小鼠（公认的DMD动物模型）中取得良好治疗效果后。
优点：无论DMD基因缺陷为何种类型，均可通过导入外源替代基因恢复或部分恢复功能。
缺点：1、病毒载体存在一定风险，如自身复制、免疫激活、插入染色体致突变、致癌等，如需通过循环系统全身注射，需要相当大的病毒载量，风险更高；2、病毒载体导入基因表达不稳定，并随时间快速递减，不能持续稳定表达；3、AAV病毒载量有限，无法携带完整Dystrophin mRNA，经剪裁的minidystrophin虽可替代大部分功能，但仍会遗留轻的临床症状[4]。
2. 外显子跳跃外
显子跳跃法是利用RNA干扰技术，在前mRNA剪切过程中，可利用反义寡核苷酸链跳过相应外显子区域，使由缺失打乱的读码框恢复正常，获得裁短的部分dystrophin蛋白，承担大部分功能。
优点：无需特殊载体与辅助用药，直接注射生物制剂；致癌、免疫激活等副作用相对少，安全性良好。
缺点：1、只能针对特定基因缺陷类型治疗，对病人选择严格；2、寡核苷酸链进入细胞膜能力有限，效率较低，特别是全身治疗，如何更好地进入目标组织等问题仍有待解决；3、寡核苷酸链仍可能有免疫原性[4]。
三、治疗新希望
1. 干细胞治疗，DMD其实是干细胞病
渥太华大学和渥太华医院的研究人员首次发现，杜氏肌营养不良（DMD）能够直接影响肌肉干细胞。2015年11月16日，Nature Medicine杂志上发表研究，颠覆了人们长期以来对这种疾病的理解，为实现更有效的治疗奠定了基础。
过去，dystrophin被认为是只存在于肌纤维的结构蛋白。Dr. Rudnicki及其团队现在发现，肌肉干细胞也表达dystrophin蛋白。这些干细胞负责在肌肉损伤之后进行修复，生成肌纤维的前体细胞。研究显示，在缺乏dystrophin的情况下肌肉干细胞生成的前体细胞少十倍，最终形成的功能性肌纤维也很少。肌肉干细胞需要通过一种分子机器感知自己在周围组织中的定向，而dystrophin是这个分子机器的关键成分。“缺乏dystrophin的肌肉干细胞无法判断哪边是上哪边是下，”Dr. Rudnicki说。“这样的信息其实很重要，肌肉干细胞需要通过感知环境来决定是进行自我更新还是分化。缺少这种信息肌肉干细胞就无法正确分裂，也不能正确修复肌肉损伤。”虽然这项研究是在小鼠细胞中进行的，但这些发现应该也适用于人类，因为所有动物的dystrophin蛋白基本相同。
这项研究是该领域的重要突破，将为研究者、患者及其家人带来新的希望[5]。”
2. DMD的治疗新靶点Jagged1
世界三大科学期刊之一的Cell杂志在线发表了一篇重量级论文,以金毛狗和斑马鱼为模型进行研究，结果发现，经过治疗的斑马鱼明显较未治疗斑马鱼活动更多，肌肉形态更好。通过这一跨物种研究，很好的证实了Jagged1基因表达增强对DMD临床症状的缓解作用。对于Jagged1基因过表达改善DMD临床表型的作用机制，认为与Jagged1/Notch信号通路有关，Jagged1是Notch跨膜蛋白的配体，这一通路与肌肉损伤后的修复密切相关。但既往研究表明，补充外源性的Jagged1非但不能增强Notch信号通路，反而减弱其作用[6]。因此只有通过其他小分子药物或基因治疗，增强内源性Jagged1基因表达，才能达到治疗DMD的目的。
3. DMD的另一个靶点P2RX7嘌呤受体
近日发表在国际知名医学杂志PLoS Medicine上的一篇论文研究结果称，中英两国科学家多年努力，找到了一种基于可治疗DMD的重要靶标—P2RX7嘌呤受体的潜在治疗方法，即通过敲除P2RX7基因，可使DMD动物模型的系列症状得到缓解，这为彻底治疗DMD提供了可能，也是人类攻克DMD这种致命疾病征程中一个具里程碑式意义的发现。
该论文课题主要研究人员蒋泰文博士介绍，他们通过分子生物学、组织学和生物化学方法以及动物模型活体行为分析，来研究DMD小鼠模型P2RX7基因的敲除对肌肉和非肌肉症状的影响。结果显示，敲除该基因4周龄的DMD小鼠肌肉组织中，一些关键功能和分子参数有显著改善，如肌肉结构改良、肌肉强度加大、肌肉炎症降低等。此外，小鼠血清肌酸激酶水平显著降低，认知损伤得到修复，骨质结构显著改善，在腿部肌肉、膈肌和心肌中，炎症减轻和肌纤维增生可持续到20月。研究还表明症状的改善与受体敲除的程度成正比，P2RX7拮抗剂的使用能进一步提高疗效，且未出现不良反应[7]。
4. 基因编辑成为杜氏肌营养不良治疗新方法
2015年12月31日， Science在线发表了三篇CRISPR/Cas9基因编辑技术应用于DMD基因治疗的论文。三篇论文分别由美国三家科研机构（哈佛大学、杜克大学和德克萨斯大学）独立完成，并在相近时间投稿。三篇论文主题都是应用基因编辑技术治疗DMD。
三篇文章有很多共同点：
都是利用CRISPR/Cas9技术做删除式基因编辑；
都是以DMD最广为应用动物模型-mdx小鼠为研究对象，进行动物体内试验。mdx小鼠DMD基因23号外显子存在一个无义突变，而基因编辑旨在完全删除这一外显子，形成永久性不含外显子23的DMD基因。
都是以得到广泛认可的AAV为载体，运载基因编辑的部件进入体内细胞。
除了观察到肌肉病理的改善——肌肉细胞膜上重新出现Dystrophin蛋白外，三个团队都证实了治疗后小鼠肌肉力量的增加。
都做了多种给药方式，包括肌肉局部注射和静脉注射、腹腔注射全身给药。都证实在全身治疗中，包括心肌在内的全身各肌肉均见到Dystrophin重新表达[8-10]。
此方法存在很多优势，也还有许多缺点，仍然需要投入大量人力物力进行研究。
DMD的治疗研究不断地出现创新治疗策略和方法，无疑让人们振奋，然而此前很多起初很有前景的治疗策略在后续研究中被否定和埋没。一种可能的治疗机制要应用到临床上，还有很长的路要走。等待的过程是漫长的，作为患者及家属我们能做什么呢？应该积极配合治疗，保持乐观的心态；做基因检测，找到致病原因，重视产前诊断，避免再次生育患儿。一起等待DMD被治愈的那天。
参考资料
1. http://www.haodf.com/zhuanjiaguandian/pumchdy_2829729217.htm
2. MD关爱项目微信公众号
3. ARMGO Pharma Receives FDA Orphan Drug Designation and Rare Pediatric Disease Designation for ARM210/S48168 for the Treatment of Duchenne Muscular Dystrophy
4. http://blog.sina.com.cn/s/blog_988f690301014mn8.html
5. http://www.wzaobao.com/p/1951sTK.html
6. Xiao, Y., Gong, D., and Wang, W. (2013). Soluble JAGGED1 inhibits pulmonary hypertension by attenuating notch signaling. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol.33, 2733–2739
7.http://digitalpaper.stdaily.com/http_www.kjrb.com/kjrb/html/2015-10/26/content_320953.htm?div=-1
8. Nelson CE, Hakim CH, Ousterout DG, et al. In vivo genome editing improves muscle function in a mouse model of Duchenne muscular dystrophy. Science. 2015 Dec 31. pii: aad5143.
9. Long C, Amoasii L, Mireault AA, et al. Postnatal genome editing partially restores dystrophin expression in a mouse model of muscular dystrophy. Science. 2015 Dec 31. pii: aad5725.
10. Tabebordbar M, Zhu K, Cheng JK, et al. In vivo gene editing in dystrophic mouse muscle and muscle stem cells. Science. 2015 Dec 31. pii: aad5177
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