2021年5月18日, Sarepta Therapeutics展示了其在研基因疗法SRP-9001的最新临床试验结果。SRP-9001通过将编码微抗肌萎缩蛋白（micro-dystrophin）的转基因递送至肌肉组织，从而让肌肉细胞产生微抗肌萎缩蛋白，治疗杜氏肌营养不良症（DMD）。试验结果证明这种疗法能有效升高人体内抗肌萎缩蛋白的表达水平，且安全性与耐受性良好。

DMD是一种致命的罕见X连锁退行性神经肌肉疾病，也是最常见的致死性遗传疾病之一。在全球范围内，每3500-5000例男婴中就有1例DMD患者。DMD患者一般在3-5岁时开始发病，十几岁时失去行走能力，30~40岁时由于呼吸或心力衰竭而去世。其发病机理是由于患者体内编码抗肌萎缩蛋白（dystrophin）的基因发生变异，导致抗肌萎缩蛋白的缺失或功能缺陷。抗肌萎缩蛋白在肌肉细胞中形成名为DAPC的蛋白复合体，DAPC可保护肌肉不在收缩过程中受损伤。抗肌萎缩蛋白的缺失或缺陷，会导致肌肉在收缩过程中出现慢性损伤以及炎症发作，最终影响肌肉的再生，导致肌肉被瘢痕组织或者脂肪代替。目前针对DMD致病机理的疗法均旨在恢复人体内抗肌萎缩蛋白的表达水平。

基因疗法SRP-9001通过将表达抗肌萎缩蛋白的转基因包装在AAV病毒载体中，通过转染患者的肌肉细胞，让肌肉生成具有部分抗肌萎缩蛋白功能的重组蛋白，可以对携带任何类型DMD基因变异的患者生效。理论上它可以让患者接受一次治疗之后，获得长期持久的改善。SRP-9001使用的是从非人灵长类动物中分离出的AAVrh74病毒载体。它表达的微抗肌萎缩蛋白是一种缩短的功能性抗肌萎缩蛋白。这种疗法的优点是能够在肌肉中引起转基因的强力表达，不会穿过血脑屏障进入中枢神经系统。而且，较少患者体内存在针对这一病毒载体的免疫力。

▲SRP-9001基因疗法的特点（图片来源：参考资料[2]）

正在进行的Study 103临床研究共入组20名年龄在4-8岁患有DMD的男童，目前公布的数据仅针对第一阶段前11名患者在治疗12周后的数据。试验旨在解决4个关键问题：

1. 转基因DNA是否成功递送到肌肉细胞内？

通过微抗肌萎缩蛋白载体基因组计数，证明SRP-9001具有稳定的转染特性，平均每个细胞核内载体基因拷贝数为3.87。

2. 转基因是否表达了想要表达的目标蛋白？

使用蛋白质印迹法（Western blot），检测结果显示微抗肌萎缩蛋白表达水平平均为正常人的55.4%。

3. 表达的蛋白位于正确的位置么？

使用荧光免疫组织化学检测，研究人员发现微抗肌萎缩蛋白阳性纤维的百分比达到70.5%，荧光强度为正常组织的116.9%。

▲SRP-9001驱动微抗肌萎缩蛋白在肌纤维表面表达（图片来源：参考资料[2]）

4. 基因疗法的安全性与耐受性如何？

安全性与先前研究一致，最常见的不良反应为呕吐，一般在第一周内发作，症状轻微，通过治疗缓解。患者的肝酶出现短暂升高，接受类固醇治疗后得到缓解，没有出现患者肝功能受损。此外没有观察到临床相关的补体激活，耐受性良好。

基于本次试验的积极结果，Sarepta公司下一步计划在2021年中与美国FDA会晤进行讨论，并且在讨论结束后开展关键性3期临床试验。

参考资料:

[1] Sarepta Therapeutics to Share Expression and Safety Results from Study 103 (ENDEAVOR) Evaluating SRP-9001, its Investigational Gene Therapy for the Treatment of Duchenne Muscular Dystrophy. May 17, 2021, from https://investorrelations.sarepta.com/news-releases/news-release-details/sarepta-therapeutics-share-expression-and-safety-results-study?_ga=2.161787388.1980422535.1621350865-784075460.1620058440

[2] Study SRP-9001-103: 12-Week Expression and Safety Data Using Commercially Representative Material https://investorrelations.sarepta.com/static-files/09358a6f-98f9-4e11-a59e-db6b0d0f584f